مراحل کشت سلول ها

محیط کشت سلولی

آزمایشگاه کشت سلول باید چه ویژگی داشته باشد!

فروش محیط کشت سلولی :

فرایند کشت سلول در محیط مصنوعی صورت می پذیرد که به ان محیط مصنوعی محیط کشت سلولی گفته می شود.

محیط کشت سلولی به دو حالت مایع و پودری موجود می باشد، این محیط کشت در واقع برای تکثیر و بقای سلول، بافت و یا اندام ها از یک حیوان یا گیاه است.

کشت سلولی :

درجه حرارت برای محیط کشت سلول و محیط رشد مناسب و انکباتور که ph اسمولالیته را حفظ می کند از نیاز های اساسی محیط برای رشد بهینه سلول هستند.
مهم ترین مرحله در کشت سلولی انتخاب بهترین محیط رشد برای کشت ازمایشگاهی است، این محیط کشت بصورت مایع یا ژلی دیده می شود که به رشد میکروارگانیسم ها سلول ها یا گیاهان کوچک کمک می کند،سلول های حیوانی را می توان به دو صورت طبیعی و یا مصنوعی کشت داد.

خرید محیط کشت سلولی :

آزمایشگاه کشت سلولی باید در محدوده قرار بگیرد که تردد کمتری در ان محدود توسط کارکنان آزمایشگاه باشد همچنین بهتر است از آزمایشگاه میکروبی فاصله داشته باشد زیرا کشت سلول بسیار فرایند حساس و هزینه زایی هست و امکان آلودگی را باید به صفر برسانیم.

دیوار و سقف آزمایشگاه باید یکدست ،صاف،بدون گوشه ،رنگ روشن،ضد آب باشد تا بتوان به راحتی تمیز و ضد عفونی کرد و همچنین بهتر است از کابینت بندی ها و سکو بندی های استیل استفاده کرد تا بتوان به راحتی کار پاکسازی محیط انجام بدهیم.

درمحیط کشت سلول معمولا از چندین اتاق متفاوت با تسویه کننده هوای مناسب استفاده می شود همچنین در ورود ی آزمایشگاه کشت سلول باید  از لباس مخصوص ازمایشگاه کشت سلولی استفاده شود.

انواع محیط کشت سلولی :

1) محیط طبیعی:

اجزای این محیط شامل عصاره های بافتی_مایعات بیولوژیکی – clots و محلول های متعادل نمک می باشد، عامل اصلی تشکیل دهنده ی محیط های طبیعی مایعات بیولوژیکی می باشد.

محیط های طبیعی برای سلول های حیوانی بسیار راخت و مفید هستند اما مهم ترین عیب آن عدم قابلیت تولید مجدد و قابلیت ساخت آن است.

2) محیط مصنوعی:

برای تهیه این دسته از محیط ها به عوامل مواد مغذی آلی و غیر آلی، ویتامین ها، نمک ها، گاز های اکسیژن و دی اکسید کربن، پروتیین های سرم_کربوهیدرات ها و کوفاکتورها تهیه می شود.

محیط کشت DMEM 

محیط کشت FBS(fetal bovine serum) 

محیط کشت RPMI 

محیط کشت pen-strep 

محیط کشت BSA(Bovine serum albomin) 

محیط کشت DMSO 

محیط کشت  DMEM F12 

مهم ترین اهداف برای تولید محیط کشت مصنوعی:

  • زنده ماندن فوری.
  • بقای طولانی مدت.
  • رشد نامحدود.

مولفه های اصلی محیط کشت سلولی:

1) بافرها:

برای شرایط کشت تنظیم phبسیار مهم است، بافر دارای دو سیستم است:

1- بافر طبیعی

2-بافر شیمیایی

که توسط یکی از سیستم های بافر به دست میاید.

2)hepes:

بافر شیمیایی با استفاده از hepes در محدوده 7.2الی 7.4دارای ظرفیت برتر می شود و به فضای کنترل شده نیازی ندارد، hepesدر برخی از سلول ها به نسبت گران تر و سمی تر است، hepes باعث افزایش بسیار زیاد حساسیت به اثرات ناشی از قرارگیری در معرض فلورسنت می شود.

3) فنول رد:

جزو اصلی اکثر محیط های کشت میباشد،که عامل مهمی در تنظیم ph نیز می باشد، در طول رشد سلول به دلیل ازاد شدن متابولیت ها توسط سلول ها شاهد تغییر phخواهیم بود که باعث تغییر رنگ می شود، فنول رد phnدر سطح پایین را به زرد تبدیل کرده و ph در سطح بالا را به رنگ بنفش تبدیل مکی کند.

4) نمک غیرآلی:

نمک الی به دلیل وجود یون های سدیم، پتاسیم و کلسیم به تنظیم پتانسیل غشا کمک چشم گیری می کند.

5) آمینو اسیدها:

جزو اصلی و سانده ی پروتیین ها هستند به همین دلیل مواد اصلی تشکیل دهنده محیط هستند،دلیل اصلی وجود اسید امینوآمینوها در محیط کشت کمک به سلول ها برای سنتز می باشد زیرا سلول به تنهایی قادر به سنتز کردن نیست.

6) کربوهیدرات ها:

منبع اصلی انرژی هستند که اغلب محیط ها دارای گلوکز و گالاکتوز و برخی دیگر شامل فالتوز و فروکتوز هستند.

7) روتیین ها و پپتدها:

این دو عنصر اهمیت بسیاز زیادی در محیط ها می باشد بدون سرم دارند،سرم شامل آلبومین، ترانسفرین، آپروتینین و فتویین است.
از موارد دیگر اسید های چرب و چربی ها هستند که دارای سرم میباشند به همین دلیل در محیط های بدون سرم بسیار اهمیت دارد.
ویتامین ها و عناصر کمیاب آنتی بیوتیک ها و سرم از مولفه های دیگر محیط می باشد.

معیار انتخاب محیط کشت سلولی:

 انتخاب محیط کشت سلولی مناسب با موفقیت آزمایشات سلولی رابطه مستقیم دارد انتخاب محیط به نوع سلول های مورد نظر کشت در ازمایشگاه بستگی دارد، مناسب ترین محیط با توجه به نیازهای رشد سلول از طریق آزمایش باید تعیین شود.

قیمت محیط کشت سلولی :

 شرکت بازرگانی ندا شیمی تنها و اصلی ترین وارد کننده محیط کشت های سلولی  از برندهای Sigma (سیگما) و Gibco  (گیبکو) می باشد و محصولات خود را با ضمانت اصالت کالا به مشتریان عزیز عرضه می کند.

خرید محیط کشت آماده :

برای سفارش اینترنتی محیط کشت سلول می توانید با شماره های فوق تماس بگیرید.

دفتر فروش مرکزی تهران : 021-44045418 (زمان اداری)

واتساپ و تلگرام : 09394453175 (زمان اداری و پایان زمان اداری)

مدیریت : 09914214699

محیط کشت Yeast Extract Agar

هر انچه که باید در مورد محیط کشت Yeast Extract Agar  باید بدانید:

محیط کشت Yeast Extract Agar  محیط کشتی برای شمارش میکرو ارگانیسم ها در نمونه های آب اشامیدنی و آب شیرین می باشد و این محیط کشت برای تشخیص بیماری یا سایر شرایط در نظر نگرفته شده است.تمام اب های طبیعت دارای ناخالصی هایی هستند معمولا وجود پاتوژن ها در آب به علت دفع فاضلاب در اب می باشد.دمای انکوباسیون 22 درجه سانتیگراد تا 36 درجه سانتی گراد اجازه می دهد تا تعداد زیادی از آلایند ه های میکروبی را  بتوانیم در محیط کشت Yeast Extract Agarبررسی کنیم.

خرید محیط کشت

شرکت ندا شیمی وارد کننده اصلی محیط کشت ،مواد شیمیایی،کیت های تحقیقاتی و تشخیصی اقدام به فروش اینترنتی و حضوری محیط کشت Yeast Extract Agar کرده است، شما می توانید از طریق تماس با ما این شرکت این محیط کشت را با ضمانت اصالت کالا و بالاترین کیفیت خرید و یا جهت دریافت لیست قیمت محیط کشت بر روی منوی لیست قیمت تهیه کنید.

خرید محیط کشت Yeast Extract Agar

برای سفارش اینترنتی محیط کشت  می توانید با شماره های فوق تماس بگیرید.

دفترمرکزی فروش تهران : 44045418 021 (زمان اداری)

واتساپ و تلگرام : 09394453175

مدیریت : 09914214699

microbiological-testing-services-nedashimi

محیط کشت Escherichia coli

هر انچه که در مورد محیط کشت Ec  Broth  (ای سی براث) باید بدانید!!!

EC  مخفف Escherichia coli می باشد وبرای تشخیص باکتری های کلی فرم در37 درجه سانتی گراد و اشیرشیا کلی در45  درجه در نمونه های آب و غذا مورد استفاده قرار می گیرد و ماهیت انتخابی محیط کشت Ec broth رشد غیر کلی فرم ها را به حداقل می رساند و این محیط کشت توصیه شده انجمن بهداشت عمومی امریکا (APHA و AOAC) می باشد.محیط کشت Ec broth حاوی پپتون های کازیین،لاکتوزو نمک های صفراوی است به عنوان مهار کننده رشد کو کی های گرم مثبت و اسپور به ویژه استرپتوکوک های مدفوع عمل می کند. پپتون های کازئین به عنوان منبع مواد غذایی از جمله پروتئوز،اسید های امینه و نمک های معدنی عمل می کنند و همچنین لاکتوز نیز به عنوان منبع کربوهیدرات عمل می کند.

شرکت ندا شیمی اقدام به فروش محیط کشت های Ec broth  با ضمانت اصالت کالا کرده است شما می توانید از بخش مربوطه تماس با ما این شرکت اقدام به خرید این محیط کشت فرمایید یا جهت دریافت لیست قیمت از منوی لیست قیمت محیط کشت اقدام نمایید.شرکت ندا شیمی وارد کننده اصلی محیط کشت های میکروبی و سلولی برندهای مرک Merck – میلیپور Millipore  – سیگما آلدریچ  Sigma Aldrich- کیولب  QUELAB- هایمد یا Himedia – فلوکا Fluka  – اکروس  Acros- دیفکو  Difco- گیبکو Gibco  در ایران می باشد.

خرید محیط کشت Ec Broth

برای سفارش اینترنتی محیط کشت  می توانید با شماره های فوق تماس بگیرید.

دفترمرکزی فروش تهران : 44045418 021 (زمان اداری)

واتساپ و تلگرام : 09394453175

مدیریت : 09914214699

محیط کشت میکروبی MR-VP

محیط کشت میکروبی MRVP

هر انچه که باید در مورد   MR-VP Mediumباید بدانید :

محیط کشت MR-VP دارای ترکیبات پپتیک ، دکستروز، دی پتاسیم فسفات می باشد و برای شناسایی با کتری های گرم منفی روده ای مورد استفاده قرار می گیرد و یک محیط کشت افتراقی می باشد.

نحوه ساخت محیط کشت MR-VP :

پانزده گرم از این محیط کشت را در هزار میلی لیتر اب مقطر حل می کنیم سپس به لوله های ازمایش منتقل می کنیم و در دمای صدو بیست و یک درجه سانتیگراد به مدت پانزده دقیقه اتوکلاو میکنیم و بعد از کشت باکتری به مدت 24-48 ساعت در دمای پانزده درجه انکوبه می کنیم.

عملکرد محیط کشت MR-VP :

به محیط کشت Methyl Red  اضافه می کنیم تغییر رنگ محیط به قرمز نشان دهنده تخمیر دکستروز در نهایت گلوکز بوسیله باکتری های کشت داده شده در این محیط هست که اسید حاصل از این تخمیر درحضور متیل رد باعث می شود PH  محیط پایین بیاید و محیط به رنگ قرمز ظاهر شود، محیط کشت حاوی باکتری اشیرشیا کلای با افزودن متیل رد به رنگ قرمز ظاهر می شود .

برای تست VP  به محیط الفانفتول و پتاس 40  درصد اضافه میکنیم در صورت وجود استوئین رنگ محیط MR-VP  به رنگ صورتی مایل به قرمز تبدیل میشود. وقتی که برخی باکتری های روده ای گلوکز را تخمیر می کنند و از انجاییکه بیشتر متابولیز های اسید پیرویک به صورت استوئین است استوئین در حضور پتاس و اکسیژن به دی استیل تبدیل می شود ودی استیل در کنار عملکرد الفا نفتول به ماده قرمز رنگ تبدیل می شود.نتیجه تست VP بر ای باکتری اشیر شیا کلای منفی می باشد.

خرید محیط کشت :

شرکت ندا شیمی فعال در فروش محیط ها ی کشت و مواد شیمیایی اقدام به فروش محیط کشت MR-VP نموده هست شما میتوانید از طریق تماس با ما شرکت ندا شیمی این محیط کشت را با ضمانت اصالت کالا و قیمت مناسب تهیه بفرمایید ویا جهت دریافت لیست قیمت محیط کشت به منوی مراجعه نمایید.

محیط کشت TSI

محیط کشت TSI

محیط کشت تریپل شوگر ایرون(TSI) محیط کشتی جامد هست و درون لوله ای و به صورت شیب دار تهیه می شود و در تشخیص باکتریهای روده ای (اعضای خانواده  انتروباکتریاسه) نقش دارد. محیط کشت TSI   شامل ترکیبات گلوکز ،لاکتوز، سوکروز ، پپتون، تیوسولفات، اهن ، اگار، بافر و معرف فنل رد می باشد، PH محیط بین 4.8 تا8.4  متغییر می باشد. مقدار گلوگز کمتر از لاکتوز و ساکارز می باشد که این باعث می شود باکتریهای تخمیر کننده قندهای مختلف تمییز داده شوند. نحوه کشت این محیط به صورت خطی و عمقی می باشد و همچنین محیط کشت TSI  به علت داشتن فنول رد به رنگ قرمز می باشد.با استفاده از محیط کشت تریپل شوگر ایرون سه مشخصه را می توان بررسی کرد که عبارتند از توانایی تولید گاز H2  و CO2 ،توانایی تولید گاز H2SO4، توانایی تخمیر گلوکز، سوکروز و لاکتوز.

با تخمیر قندها محیط اسیدی شده زرد رنگ می شود و از H2  و CO2  تولید می گردد که تولید این گازها باعث ترک خوردگی و جابجایی محیط کشت تریپل شوگر ایرون می شود.تولید گاز سولفید هیدوژن از طریق سیاه شدن محیط مشخص می شود در واقع اهن موجود در این محیط کشت مانع خروج گاز سولفید هیدروژن از محیط می شود و این عمل باعث سیاه شدن محیط کشت TSI  می شود.

محیط کشت TSI

          محیط کشت TSI

خرید محیط کشت TSI

شرکت ندا شیمی فعال در فروش محیط ها ی کشت و مواد شیمیایی اقدام به فروش محیط کشت TSI نموده است شما می توانید از طریق تماس با ما ،این شرکت  محیط کشت را با ضمانت اصالت کالا و قیمت مناسب تهیه فرمایید یا به جهت دریافت لیست قیمت محیط کشت به منوی مربوطه مراجعه نمایید

محیط کشت SIM

محیط کشتSIM   شامل ترکیبات تریپتون ، پپتون، سولفات امونیوم اهن، تی سولفات سدیم، اگار،و بافت حیوانی (برای تامین اسیدهای امینه و مواد مغذی لازم برای رشد باکتریها) می باشد،شرکت نداشیمی در زمینه فروش محیط های کشت و ماده شیمیایی و کیت های تحقیقاتی فعال می باشد و محیط های کشت SIM را با ضمانت اصالت کالا و بالاترین کیفیت عرضه می کند.