محیط کشت سلولی

محیطهای کشت سلول و انواع آن

کشت سلولی یکی از تکنیک‌های اساسی در زیست‌شناسی، پزشکی و بیوتکنولوژی است که در آن سلول‌ها خارج از محیط طبیعی خود و در شرایط کنترل‌شده رشد داده می‌شوند.  محیط‌های کشت سلولی برای تأمین مواد مغذی، فاکتورهای رشد و شرایط فیزیکی مطلوب طراحی شده‌اند تا زنده ماندن و تکثیر سلول‌ها را ممکن سازند.

انتخاب محیط کشت مناسب برای رشد و نگهداری سلول‌ها بسیار مهم است. بسته به نوع سلول، هدف تحقیقاتی و نیازهای خاص، از محیط‌های مختلفی استفاده می‌شود. درک تفاوت‌های بین این محیط‌ها برای موفقیت در کشت سلولی ضروری است.

انواع محیط های کشت سلولی

1. دسته بندی بر اساس ترکیب شیمیایی

الف) محیط های کشت طبیعی:

شامل سرم خون، عصارههای بافتی و پلاسما که دارای عوامل رشد و مواد مغذی هستند.
این محیط ‌ها از منابع بیولوژیکی مانند سرم خون، عصاره‌های بافتی و پلاسما استخراج شده و حاوی مواد مغذی ضروری برای رشد سلول‌ها هستند. برخی از مهم‌ترین محیط‌های طبیعی شامل موارد زیر هستند:
سرم جنین گاو (FBS – Fetal Bovine Serum): حاوی پروتئین‌ها، هورمون‌ها و فاکتورهای رشد است و برای بسیاری از انواع سلول‌های پستانداران استفاده می‌شود.
عصاره‌های بافتی: از بافت‌های حیوانی استخراج شده و برای رشد سلول‌های اولیه مناسب هستند.
پلاسما: دارای عوامل رشد و تنظیم‌کننده‌های زیستی است.

ب) محیطهای کشت مصنوعی:

محیطهایی با ترکیب شیمیایی مشخص مانند DMEM ، RPMI-1640 و Ham’s F-
این محیط‌ها دارای ترکیب شیمیایی مشخص هستند و مواد مغذی مورد نیاز سلول‌ها از جمله اسیدهای آمینه، قندها، نمک‌های معدنی، ویتامین‌ها و فاکتورهای رشد را در بر دارند. برخی از محیط‌های مصنوعی رایج عبارتند از:

(Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium) DMEM : محیطی مناسب برای انواع سلول‌های چسبنده و فیبروبلاستی.
RPMI-1640: معمولاً برای کشت سلول‌های سیستم ایمنی و لنفوسیت‌ها استفاده می‌شود.
محیط کشت RPMI : اولین بار توسط مور (Moore) و همکاران در Roswell Park Memorial Institute تولید شد که نام این محیط نیز مخفف نام همین موسسه می باشد .

Ham’s F-12 : مناسب برای سلول‌های اپی‌تلیالی و برخی از انواع سلول‌های سرطانی.
Ham’s F12 : یک محیط کشت سلولی است که در ابتدا توسط Richard Ham برای رشد سلول‌های همستر چینی تخمدان (CHO) توسعه یافته است. این محیط کشت به دلیل ترکیب منحصر به فردی که دارد، به عنوان یک محیط کشت عمومی برای انواع مختلف سلول‌های پستانداران، به ویژه سلول‌های اپیتلیال، اندوتلیال و گرانولوزا، شناخته می‌شود.

McCoy’s 5A : برای رشد سلول‌های متاستاتیک و برخی از انواع اولیه سلولی.
محیط ۵ای مک کوی یک محیط بازال همه کاره برای کشت انواع سلول های اولیه و خطوط سلولی است. مانند :سلول های اولیه پستانداران حاصل از مغز استخوان، پوست، طحال، کلیه، ریه و …
این محصول شامل: 3.0 گرم در L D- گلوکز, L-گلوتامین, پپتون, نه سدیم پیرووات, HEPES.
این محصول برای تحقیقات علمی و برای کشت آزمایشگاهی بافت ها و سلول ها است استفاده بالینی آن ممنوع است.
(Minimal Essential Medium) MEM : محیط پایه‌ای که برای بسیاری از انواع سلول‌ها مورد استفاده قرار می‌گیرد.

2. دسته بندی بر اساس حالت فیزیکی

الف) محیطهای مایع: برای کشت سلولهای معلق استفاده میشود.
ب) محیطهای نیمهجامد: حاوی مقدار کمی آگار یا ژلاتین برای کنترل حرکت سلولها.
ج) محیطهای جامد: برای سلولهایی که به چسبیدن به سطح نیاز دارند، مانند سلولهای فیبروبلاستی.

3. دسته بندی بر اساس عملکرد

الف) محیطهای پایه : برای تأمین مواد مغذی سلولها.
ب) محیطهای انتخابی : برای رشد سلولهای خاص طراحی شدهاند.
ج)محیطهای اختصاصی: برای انواع خاصی از سلولها مانند سلولهای بنیادی و سرطانی.

محیط های کشت رایج و ویژگیهای آنها

DMEM. 1مناسب برای سلولهای فیبروبلاست و بنیادی.
RPMI-1640 .2 مناسب برای سلولهای خونی و سیستم ایمنی.
Ham’s F-12 .3مناسب برای سلولهای اپیتلیالی و سرطانی.
McCoy’s 5A .4 مناسب برای سلولهای متاستاتیک.
MEM .5 برای کشت سلولهای چسبنده.

مکمل های مورد استفاده در محیط های کشت سلولی

سرم جنین گاو : (FBS) تأمینکننده فاکتورهای رشد. حاوی پروتئین‌ها، هورمون‌ها و فاکتورهای رشد است و برای بسیاری از انواع سلول‌های پستانداران استفاده می‌شود.
آنتیبیوتیکها: جلوگیری از آلودگی باکتریایی.
فاکتورهای رشد: تحریک رشد و تقسیم سلولی.
گلوتامین: منبع انرژی برای سلولها که نقش مهمی در متابولیسم آن‌ها دارد.

شرایط مناسب برای کشت سلولی

دمای مناسب: 37 درجه سانتیگراد.
pH مناسب 7.2 : تا 4 7.
میزان 5% : CO₂
رطوبت مناسب: جلوگیری از تبخیر محیط کشت.

مراحل کشت سلول به صورت مختصر

ابتدا بذر سلولی مورد نظر از فریزر خارج و اجازه دهید تا آب گردد.
مقدار 8 میلی لیتر از محیط کشت مورد نظر که قبلا تهیه گردیده و فیلتر شده و به صورت استریل می باشد را داخل یک فلاسک کشت سلول ml25 در شرایط استریل و در زیر هود بیولوژیک بریزید.
ابتدا مقدار 1 میلی لیتر یعنی 10 درصد سرم FBSاضافه نمایید و سپس مقدار 1 میلی لیتر از بذر سلول را به فلاسک اضافه نمایید و آنتی بیوتیک به مقدار 100 میکرو لیتر به فلاسک اضافه نموده و در انکوباتور 37 درجه با 5 درصد CO2 انکوبه نمایید و روزانه به صورت میکروسکوپی رشد سلول را مورد بررسی قرار دهید .
زمانی که سلول‌ها به یک سطح رشد خاص (معمولاً 70-80 درصد) برسند، نیاز به پاساژ دارند. این شامل جدا کردن سلول‌ها (با استفاده از تریپسین یا روش‌های دیگر)، رقیق‌سازی آن‌ها و کشت دادن در ظروف کشت جدید است تا از رشد بیش از حد جلوگیری شود و زنده‌مانی حفظ گردد.

کاربرد کشت سلول

یکی از اهداف کاربرد کشت سلول در محیط کشت سلول و تکثیر آن مطالعه تکامل موجودات می باشد اینکه چگونه یک سلول تلقیح یافته ممکن است تبدیل به یک موجود پرسلولی شود و هریک از سلول های آن از لحاظ ، مورفولوژی و ظاهری و عملکرد کاملا منحصر به فرد باشد برای بررسی این کاربرد کشت سلول می توان سلول لقاح یافته را در محیط کشت سلولی مخصوص خود کشت داد و مراحل مختلف رشد و تمایز آن را بررسی کرد،به کمک فرایند کشت سلولی می توان سلول های همسانی را تولید نمود و فرایند های مربوط به تکثیر DNA و رونوشت و سنتز پروتین مورد مطالعه قرار داد ،همچنین بوسیله سلول های تکثیر شده در محیط کشت سلولی  می توان محصولات تولید شده بوسیله سلول های سرطانی را بررسی کرد.

خرید محیط کشت سلولی

شرکت ندای شیمی ایرانیان با درک نیازهای حساس و تخصصی آزمایشگاه‌های فعال در زمینه کشت سلولی و زیست‌فناوری، طیف گسترده‌ای از محصولات و محیط‌های کشت را از برندهای معتبر بین‌المللی تأمین می‌کند، از جمله:

Gibco – : پیشرو در تولید محیط‌های کشت سلولی، سرم‌ها و مواد افزودنی با کیفیت بالا

Sigma-Aldrich – :ارائه‌دهنده محیط‌های کشت تخصصی و محصولات مکمل

Lonza – :تولیدکننده محیط‌های اختصاصی برای انواع سلول‌های انسانی و جانوری

Hyclone – :تولیدکننده سرم‌های FBS و محلول‌های تخصصی برای تحقیقات زیستی

PAN-Biotech –: برند آلمانی با کیفیت بالا در زمینه محیط‌های کشت و مکمل‌های سلولی

BioSera – : تولیدکننده معتبر سرم‌های FBS و محلول‌های کشت سلولی با استانداردهای بین‌المللی

شرکت ندا شیمی تنها و اصلی ترین وارد کننده محیط کشت های سلولی  از برندهای Sigma (سیگما) وGibco  (گیبکو) می باشد و محصولات خود را با ضمانت اصالت کالا به مشتریان عزیز عرضه می کند.

ندای شیمی ایرانیان با تأمین محصولات اورجینال و باکیفیت و ارائه مشاوره‌های تخصصی، به پژوهشگران و فعالان حوزه زیست‌فناوری کمک می‌کند تا پروژه‌های تحقیقاتی خود را با اطمینان از اصالت و استاندارد بالای مواد اولیه انجام دهند.

محصولات تأمین‌شده توسط ندای شیمی ایرانیان شامل:
انواع محیط‌های کشت پایه DMEM, RPMI, MEM, F12 و ….
سرم‌های تخصصی FBS، سرم‌های خاص و مکمل‌ها
آنتی‌بیوتیک‌ها، تریپسین و مواد افزودنی برای کشت سلولی
محیط‌های تخصصی برای سلول‌های بنیادی، سلول‌های اولیه و کشت‌های سه‌بعدی

برای سفارش اینترنتی محیط کشت سلول می توانید با شماره های فوق تماس بگیرید.

دفتر مرکزی فروش تهران : 44045418 – 021 (زمان اداری)

واتساپ و تلگرام : 09394453175 (زمان اداری و پایان زمان اداری)

واتساپ و تلگرام : 09932428781 ( استعلام فوری و آنلاین در زمان های اداری و غیر اداری)