نوشته‌ها

کیت استخراج پلاسمید

کیت استخراج Plasmid DNA

پلاسمید یک مولکول DNA دو رشته ای دایره ای و خارج کروموزومی است که در زیست شناسی مولکولی برای دستکاری و رمزگشایی اطلاعات ژنتیکی از اهمیت بالایی برخوردار است.

اصطلاح “پلاسمید” اولین بار توسط جوشوا لدربرگ در سال 1592 ابداع شد. باکتری ها می توانند پلاسمیدهای جدیدی را از سایر سلول های باکتریایی و یا از محیط دریافت کنند. آن ها همچنین می توانند به آسانی پلاسمید را از دست بدهند.

برای مثال، وقتی یک باکتری به دو قسمت تقسیم شود، ممکن است یکی از سلول های دختر دریافت پلاسمید از دست بدهد. هر پلاسمید «منشأ همانند سازی» خاص خود را دارد که باعث می شود باکتری میزبان از آن تکثیر (کپی) کند. به همین دلیل، پلاسمیدها می توانند خود را به طور مستقل از کروموزوم باکتریایی کپی کنند، بنابراین می توان نسخه های زیادی از پلاسمید را درون یک سلول باکتریایی تکثیر کرد.

کیت استخراج پلاسمید

پلاسمیدها به باکتری ها برای زنده ماندن کمک می کنند. پلاسمیدها حاوی فقط چند ژن هستند، اما تفاوت زیادی در باکتری میزبان خود ایجاد می کنند.این ژن ها معمولاً برای بقای روز باکتری ها ضروری نیستند، ولی آن ها به باکتری کمک می کنند تا بر اوضاع تنش زای گاه به گاه غلبه کند.

به عنوان مثال، بسیاری از پلاسمیدها حاوی ژن هایی هستند که با بیان آن، باکتری میزبان را در برابر آنتی بیوتیک مقاوم می کنند.

بنابراین وقتی با آن آنتی بیوتیک درمان شود، از بین نمی رود. پلاسمیدهای دیگر حاوی ژن هایی هستند که به میزبان کمک می کنند تا مواد غیرمعمول را هضم کند یا انواع دیگر باکتری ها را از بین ببرد.

همچنین به عنوان مؤلفه های کلیدی در روش های کلون سازی و بیوتکنولوژیک تکامل یافته اند، زیرا دستکاری آن ها ساده تر است. پلاسمیدها در طیف گسترده ای از گونه های باکتریایی (Archae، Eukarya، Eubacteria) یافت می شوند و می توانند به طور مستقل تکثیر شوند.

روش استخراج پلاسمید :

جداسازی DNA پلاسمید از باکتری ها یک روش مهم در زیست شناسی مولکولی است و در بسیاری از مراحل مانند کلونینگ، تعیین توالی DNA ، ترانسفکشن و ژن درمانی یک گام اساسی است.

این دستکاری ها نیاز به جداسازی DNA پلاسمید با خلوص بالا دارند. پلاسمید خالص می تواند برای استفاده فوری در کلیه مراحل زیست شناسی مولکولی استفاده شود.

خالص سازی DNA پلاسمید از DNA باکتری ها با استفاده از روش لیز قلیایی که در زیست شناسی مولکولی برای جدا کردن پلاسمید DNA یا سایر اجزای سلولی مانند پروتئین ها با شکستن سلول ها به کار می رود، انجام می شود. مراحل اساسی جداسازی پلاسمید ایجاد اختلال در ساختار سلولی برای ایجاد لیز، جداسازی پلاسمید از DNA کروموزومی، بقایای سلولی و سایر مواد نامحلول است.

باکتری ها با یک محلول بافر لیز حاوی سدیم ددسیل سولفات (SDS) و هیدروکسید سدیم لیز می شوند.در کیت استخراج پلاسمید از غشاهای میکروفیبرشیشه ای و روش لیز قلیایی استفاده می شود. پلاسمید از سلول باکتریایی آزاد می شود و RNA با کمک آنزیم  RNase از لیز سلولی حذف می گردد.

زواید سلولی و رسوبات نمکی نیز با کمک سانتریفوژ در نهایت حذف می شود. در غلظت نمکی بالا، DNA پلاسمیدی به غشای میکروفیبری ستون متصل می شود. سپس با کمک بافرهای شست و شوی مختلف، آلودگی ها و زواید سلول باکتری حذف می شود و در نهایت به وسیله آب دیونیزه یا بافر با قدرت نمکی پایین، پلاسمید از ستون میکروفیبرخارج شده و در تیوب جمع آوری می شود.

روش انجام کار استخراج پلاسمید :

  1. کشت سلولی با سرعت بالا سانتریفیوژ می شود و مایع رویی دور ریخته می شود.
  2. سوسپانسیون باکتریایی از طریق افزودن بافر P1 به رسوب سلولی ایجاد می شود و به تیوب جدید انتقال می یابد.
  3. بافر P2 اضافه شده و سپس تیوب به آرامی برای 4 دفعه سرو ته می شود. )ورتکس نشود(
  4. بافر P3 اضافه می شود تیوب برای 5-6 بار سرو ته می گردد.
  5. به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ می شود.
  6. سپس سوپرناتانت به ستون کیت انتقال می یابد و سانتریفیوژ به مدت 30 ثانیه انجام می شود. مایع جمع شده در تیوب دور ریخته می شود.
  7. حال بافر P4 اضافه می شود به مدت 30 ثانیه سانتریفیوژ انجام می گیرد، مایع جمع شده دور ریخته می شود.
  8. بافر P5 اضافه می شود و سانتریفیوژ به مدت 30 ثانیه انجام می شود و بازهم ، مایع جمع شده در تیوب دور ریخته می شود.
  9. برای حذف باقی مانده های بافر شستشو به مدت 1 دقیقه سانتریفیوژ می شود.
  10. در نهایت بافر P6 یا آب دیونیزه اضافه می شود، و در دمای اتاق به مدت 1 دقیقه قرار داده می شود و پس از آن سانتریفیوژ نهایی به مدت 1 دقیقه صورت می گیرد.
کیت استخراج پلاسمید

کیت استخراج پلاسمید

خرید کیت استخراج پلاسمید

شرکت بازرگانی ندا شیمی وارد کننده کیت های پلاسمید (Plasmid Kit) از برندهای معتبر و مطرح دنیا می باشد.

فروش کیت استخراج پلاسمید

برای سفارش درخواست های خود می توانید با شماره های ذیل تماس بگیرید.

دفترمرکزی فروش تهران : 44045418 021 (زمان اداری)

واتساپ و تلگرام : 09394453175 (برای استعلام فوری و ان لاین در زمان اداری و غیر اداری)

مدیریت : 09914214699

 

نمایندگی کیاژن

شرکت کیاژن

شرکت کیاژن در اوسط سال 1980 تاسیس شد ، در آن زمان بیوتکنولوژی در حال پیشرفت بود و این مرکز به عنوان مرکزی برای انجام بخش عمده ای از تحقیقات دانشگاه احداث شده بود.

امروزه حدود 4700 نیروی متخصص در بیش از 25 کشور جهان تقریباً در همه جا محصولات و خدمات کیاژن را به مشتریان ارائه می دهند،کیاژن به بیش از 500000 مشتری در سراسر جهان محصولات عرضه می کند و مرکز اصلی آن در آلمان می باشد.

 پزشکان به دنبال راه حل های ما برای تشخیص بیماری ها و به دست آوردن اطلاعات دقیق برای تصمیم گیری های درمانی بهتر هستند و محققان زیادی برای پژوهش ها وکسب اطلاعات از ژنوم ، درک بهتر آن و نیز برای ساخت داروهای جدید ، به محصولات کیاژن رجوع می کنند.

محققان پزشکی قانونی ، دامپزشکان و آزمایشگاه های ایمنی مواد غذایی از جمله این مراکز هستند.
محصولات این شرکت طیف گسترده ای از برنامه های آزمایش مولکولی را شامل می شود ،محصولات آن شامل استخراج ، خالص سازی و تثبیت DNA ، RNA و پروتئین از نمونه های بیولوژیکی می باشد.

 یکی از مهمترین اهداف آن تلاش برای درک بهتر و بیشتر محقق از اطلاعات نهفته در DNA  و ژنوم است .

فن آوری های جدید این آزمایش ها می توانند انواع و تعداد بالای مولکول ها را هدف قرار دهند.

نرم افزار QIAGEN مقادیر زیادی از داده ها را برای ارائه اطلاعات ارزشمند تجزیه و تحلیل و تفسیر می کند.

QIAGEN راه حل های پیشرفته آزمایش های مولکولی را ارائه می دهد که محققان را در کل فرآیند سریعتر ، بهتر و کارآمدتر هدایت می کند. این کمپانی دائما در تلاش است که مشکلات را شناسایی کرده و در جهت رفع آنها، چاره اندیشی کند.

Qiagen

Qiagen

مراکزی که از محصولات شرکت کیاژن  استفاده می کنند:

  • مراکز تشخیص مولکولی Diagnostics Molecular : ارائه دهندگان مراقبت های بهداشتی با استفاده از اطلاعات مولکولی برای راهنمایی مراقبت از بیمار ، به خصوص در زمینه های مرتبط با آنکولوژی ، بیماری های عفونی و نظارت بر ایمنی.
  •  آکادمی : دانشمندان در حال کشف و پژوهش در مکانیسم ها و مسیرهای مولکولی و همچنین تبدیل اکتشاف ها به اهداف دارویی جدید یا برنامه های تجاری.
  • شرکت های داروسازی : داروسازی و بیوتکنولوژی با استفاده از اطلاعات مولکولی و آزمایش برای کشف مواد مخدر ، تدوین استراتژی های پزشکی شخصی و مدیریت آزمایشات بالینی.
  • آزمون كاربردي : سازمان هاي دولتي يا صنعتي در زمينه هايي مانند پزشكي ، تشخيص دامپزشكي و امنيت غذايي.

عمده محصولات شرکت کیاژن مربوط به استخراج DNA /RNA هستند که به صورت کیت هایی با تعداد تست های متنوع تولید می شوند.

همچنین کیت های مورد استفاده در مراکز پزشکی قانونی ،تشخیص هویت و آزمایش های بالینی از جمله محصولات آن هستند.

خدمات برای نسل جدید توالی یابی ژنوم(NGS) و خدمات تابعه آن، پنل های فارماکوژنومیکس انسانی ،پیروسیکیونسینگ (Pyrosequencing) ، خدمات اپی ژنومیکس و متاژنومیکس را دارا می باشد.

نمایندگی محصولات کیاژن در ایران

شرکت ندا شیمی وارد کننده  محصولات برند کیاژن  (Qiagen) در ایران می باشد و واردات خود را در کمترین زمان ممکن انجام می دهد.

نمایندگی شرکت Qiagen در ایران

برای سفارش اینترنتی درخواست های خود میتوانید با شماره های فوق تماس بگیرید.

دفترمرکزی فروش تهران :  44045418 021 (زمان اداری)

واتساپ و تلگرام : 09394453175   (برای استعلام فوری و ان لاین در زمان اداری و غیر اداری)

مدیریت : 09914214699