نوشته‌ها

محیط کشت MRS

محیط‌ کشت MRS

محیط‌ های کشت MRS پایه‌ای‌ترین ابزار برای مطالعات تخصصی روی لاکتوباسیل‌ها

در علوم میکروبیولوژی و بیوتکنولوژی، جداسازی و پرورش باکتری‌های مفید مانند باکتری‌های اسید لاکتیک (LAB)، به‌ویژه گونه‌های لاکتوباسیلوس (Lactobacillus spp.)، نقش مهمی در تحقیقات پایه، محصولات دارویی و صنایع غذایی ایفا می‌کند.
یکی از شناخته‌شده‌ترین و دقیق‌ترین محیط‌های کشت برای این دسته از باکتری‌ها، محیط  کشت MRS است؛ محیطی که توسط سه میکروبیولوژیست برجسته، de Man Rogos, و Sharpe طراحی شد و به‌همین دلیل نام آن به اختصار MRS انتخاب گردید. این محیط به‌طور خاص برای رشد انتخابی لاکتوباسیل‌ها در حضور سایر میکروارگانیسم‌ها طراحی شده و اکنون در طیف گسترده‌ای از مطالعات تحقیقاتی و صنعتی مورد استفاده قرار می‌گیرد.

خرید-محیط-کشت

خرید-محیط-کشت-نداشیمی

برای مشاوره و سفارش اینترنتی محیط کشت  می توانید با شماره های ذیل تماس بگیرید.

دفترمرکزی فروش تهران : 44045418 021 (زمان اداری)

واتساپ و تلگرام : 09394453175 (زمان اداری و پایان زمان اداری)

واتساپ و تلگرام : 09932428781 ( استعلام فوری و آنلاین در زمان های اداری و غیر اداری)

ساختار محیط کشت MRS و سازوکار انتخابی آن

ترکیب شیمیایی محیط MRS بسیار دقیق و مهندسی‌شده است. این محیط شامل پپتون‌های گوشت، عصاره مخمر، گلوکز به‌عنوان منبع اصلی کربن، سدیم استات، آمونیوم سیترات، منیزیم سولفات، منگنز سولفات، و سورفکتانت پلی‌سوربات 80 می‌باشد. هر یک از این اجزا نقش مهمی در رشد انتخابی لاکتوباسیل‌ها دارند. به عنوان مثال:
سدیم استات و آمونیوم سیترات باعث مهار رشد باکتری‌های ناخواسته به‌ویژه باکتری‌های گرم‌منفی می‌شوند.
پلی‌سوربات 80 به‌عنوان سورفکتانت، نفوذپذیری دیواره سلولی را برای جذب بهتر مواد غذایی افزایش می‌دهد.
منیزیم و منگنز، به‌عنوان کوفاکتورهای آنزیمی، موجب بهبود متابولیسم در لاکتوباسیلوس‌ها می‌شوند.
این فرمول ‌بندی محیطی را پدید می‌آورد که به‌شکل مؤثری رشد لاکتوباسیل‌ها را در شرایط رقابتی افزایش داده و به حذف نسبی سایر میکروارگانیسم‌های غیرهدف کمک می‌کند.

MRS Brothفرم مایع محیط برای کشت حجیم و استخراج ژنتیکی

MRS Broth یا فرم مایع محیط، برای پیش‌کشت (preculture)، افزایش جمعیت لاکتوباسیلوس‌ها، و همچنین برای کاربردهای مولکولی مانند استخراج DNA و RNA استفاده می‌شود. معمولاً این محیط در دمای 30 تا 37 درجه سانتی‌گراد و در شرایط بی‌هوازی یا میکروآئروفیلیک انکوبه می‌شود. برای فراهم‌سازی محیط بی‌هوازی، از تکنیک‌هایی مانند استفاده از کیسه‌های گاززدا، پارافین مایع، یا سیستم‌های AnaeroJar استفاده می‌شود.
در آزمایشگاه‌های مولکولی، لاکتوباسیلوس‌های کشت داده‌شده در MRS Broth، منبع بسیار مناسبی برای استخراج DNA ژنومی محسوب می‌شوند. این DNA برای تعیین توالی ژنی (16S rRNA)، بررسی مقاومت آنتی‌بیوتیکی، کلونینگ، یا مطالعه برهم‌کنش‌های پروبیوتیکی استفاده می‌شود.

MRS Agar محیط جامد برای جداسازی کلونی‌های خالص

MRS Agar فرم جامد شده‌ی این محیط با استفاده از آگار با درجه میکروبیولوژی است. این فرم از محیط بیشتر برای شمارش، جداسازی و خالص‌سازی کلونی‌ها کاربرد دارد. در محیط جامد، لاکتوباسیل‌ها پس از 48 تا 72 ساعت انکوباسیون در شرایط بی‌هوازی، کلونی‌هایی با ظاهر کرم رنگ، صاف یا کمی محدب تشکیل می‌دهند. استفاده از این محیط در بررسی ترکیب میکروبی نمونه‌هایی مانند:

بررسی کمی و کیفی میکروبی داروسازی
فرآورده‌های لبنی تخمیری (ماست، کفیر، پنیر)
نمونه‌های روده‌ای (مدفوع انسان یا حیوان)
غذاهای تخمیری سنتی (دوغ، خمیر ترش)
نمونه‌های زیست‌محیطی (کود، خاک، کمپوست)

کاربردهای تخصصی محیط‌ های MRS در علوم پیشرفته

1. تحقیقات پروبیوتیکی:
استفاده از محیط‌های MRS جهت غربالگری سویه‌های پروبیوتیک مقاوم به شرایط اسیدی و صفراوی، بررسی توانایی تولید باکتریوسین‌ها، و بررسی تعاملات بین LAB و میکروبیوتای روده اهمیت بسیاری دارد.
2. ژنومیکس و ترانسکریپتومیکس:
لاکتوباسیل‌هایی که در محیط MRS رشد یافته‌اند، می‌توانند منبع DNA و RNA برای پروژه‌های تعیین توالی ژنومی، PCR، qPCR، RNA-seq و مطالعات متاژنومیکس باشند.
3. کاربردهای صنعتی:
کنترل کیفی مواد اولیه و محصولات نهایی در صنایع غذایی تخمیری و دارویی (مانند پروبیوتیک‌ها و مکمل‌های تغذیه‌ای) با استفاده از این محیط انجام می‌شود. در بسیاری از استانداردهای بین‌المللی ISO و USP، MRS agar به عنوان محیط مرجع معرفی شده است.

شیوه استفاده بهینه از MRS Broth و MRS Agar

pH محیط در زمان آماده‌سازی باید حدود 6.2 تنظیم شود.
انکوباسیون در شیشه‌های مهر و موم شده یا جار بی‌هوازی انجام شود.
در صورت کشت از منابع پیچیده، می‌توان از مکمل‌های انتخابی مانند ونکومایسین یا اسید گالیک برای افزایش اختصاصیت استفاده کرد.
در صورت نیاز به نگهداری بلندمدت، کلونی‌ها را می‌توان در محیط MRS Broth با گلیسرول در دمای -80 درجه سانتی‌گراد فریز کرد.

MRS Agar

MRS آگار توسط محققان deMan ، Rogosa و Sharpe به عنوان یک محیط کشت غیر انتخابی جایگزین برای کشت لاکتوباسیلهای پرمصرف توسعه یافت. در محیط های قبلی برای کشت لاکتوباسیل ها از آب گوجه فرنگی استفاده می کردند ، اما آگار آب گوجه فرنگی به دلیل تنوع و دشواری در تهیه آن ، نامطلوب بود. محیط کشت های که توسط لاکتوباسیل های لبنی رضایت بخش نبود. با توجه به این نکته ، دمان ، روگوسا و شارپ امیدوار بودند که یک محیط رشد جدید و عمومی غیر انتخابی برای لاکتوباسیل ها ایجاد کنند. آنها دریافتند که گنجاندن Tween 80 ، سیترات و استات منجر به رشد بهتر لاکتوباسیل ها می شود. منگنز و منیزیم یونهای معدنی هستند که برای رشد در حضور سیترات لازم هستند. این محیط کشت کاملا انتخابی نمی باشد  بنابراین ، میکرو فلورای ثانویه ممکن است به خوبی رشد کرده و برای مواد مغذی رقابت کند. با این حال ، بسیاری از این میکروارگانیسم های همراه با افزودن غلظت های مختلفی از مواد انتخابی مانند سیکلوهگزیمید ، پلی مکسین ، تالیم استات ، اسید سوربیک ، اسید استیک یا نیترات سدیم به محیط مهار می شوند.

MRS Broth

مواد زیر اجزای تشکیل دهنده این محیط هستند.در صورتی که آگار را از محیط حذف کنیم محیط MRS Broth  تهیه می شود که این محیط مشابه MRS Agar  اما در حالت مایع می باشد.

Dextrose20.0gm
Peptic Digest of Animal Tissue10.0gm
Beef Extract10.0gm
Yeast Extract5.0gm
Sodium Acetate5.0gm
Dipotassium Phosphate2.0gm
Ammonium Citrate2.0gm
Tween 801.0gm
Magnesium Sulfate0.1gm
Manganese Sulfate0.05gm
Agar15.0gm
MRS-Agar-&-MRS-Broth

MRS-Agar-&-MRS-Broth

خرید محیط کشت MRS Agar

شرکت ندا شیمی  وارد کننده اصلی محیط کشت ام آر اس آگار (MRS Agar)و ام آر اس براث (MRS Broth) و انواع محیط های دیگر از برندهای مرک Merck – میلیپور Millipore –سیگما ادریچ Sigma Aldrich-کیولب QUELAB-هایمد یا Himedia- فلوکا Fluka  – اکروس Acros-گیبکو Gibco وهمچنین محیط های کشت شارلو Scharlau- بیولایف Biolife – کوندا Conda pronadisa می باشد.

خرید محیط کشت MRS Broth

شرکت ندا شیمی با توجه به نیاز بازار اقدام به فروش کلیه محیط کشت های اماده کرده است که ساخته شده توسط کارشناسان خبره در ازمایشگاه های مجهز و با کنترل کیفیت عالی می باشد. این شرکت در مورد کلیه فروش و خدمات خود ضمانت اصل بودن کالا را متعهد می باشد.

محیط-کشت TCBS-Agar

ندا شیمی بزرگترین وارد کننده و فروشنده انواع محیط کشت از برند های معتبر در ایران

برای مشاوره و سفارش اینترنتی محیط کشت  می توانید با شماره های ذیل تماس بگیرید.

دفترمرکزی فروش تهران : 44045418 021 (زمان اداری)

واتساپ و تلگرام : 09394453175 (زمان اداری و پایان زمان اداری)

واتساپ و تلگرام : 09932428781 ( استعلام فوری و آنلاین در زمان های اداری و غیر اداری)