کیت تحقیقاتیpcr

کیت pcr

راهنمای کامل خرید کیت PCR :

واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR)، روشی است که برای ساخت نسخه های بی شماری از یک قطعه خاص از DNA به سرعت و با دقت انجام می شود،واکنش زنجیره ای پلیمراز محققان را قادر می سازد مقادیر زیادی دی ان ای را که برای آزمایش ها و مراحل مختلف در زیست شناسی مولکولی، تجزیه و تحلیل پزشکی قانونی، زیست شناسی تکاملی و تشخیص پزشکی لازم است بدست آورند.

تاریخچه ساخت کیت PCR :

کیت تحقیقاتی PCR در سال 1983 توسط بیوشیمیست آمریکایی و کری مالیس ساخته شد،وی در سال 1993 به دلیل کارهای پیشگامانه جایزه نوبل شیمی را به دست آورد و قبل از توسعه  روش PCR ، روش های بکار رفته در تولید نسخه هایی از قطعات دی ان ای نوترکیب وقت گیر و پر کار بودند اما امروزه ماشینی که برای انجام واکنش های پی سی ار طراحی شده است، می تواند تنها در طی چند ساعت میلیاردها نسخه DNA را از یک قطعه دی ان ای تولید کند.

مرحله PCR روشی رایج است که در آزمایشگاه های تحقیقات پزشکی و بیولوژیکی مورد استفاده قرار می گیرد در مراحل اولیه پردازش DNA برای تعیین توالی استفاده می شود همچنین برای شناسایی وجود یا عدم وجود یک ژن، برای شناسایی عوامل بیماری زا در هنگام عفونت و تولید نمودار های DNA پزشکی قانونی از نمونه های ریز دی ان ای کمک می گیرند.

pcr-kit

pcr-kit

معرفی دستگاه PCR و ترموسایکلر به عنوان اساس کار این دستگاه:

روش PCR اتفاقی است که در سلول می افتد را در شرایط کنترل شده در آزمایشگاه شبیه سازی می کند. یعنی وقتی DNA قبل از تقسیم سلولی کپی (تکثیر) می شود ، ماشینی که استفاده می شود به سادگی یک دستگاه PCR یا یک ترموسیکلر نامیده می شود ،لوله های آزمایشگاهی حاوی مخلوط مورد علاقه دی ان ای در دستگاه قرار داده می شوند و دستگاه دما را متناسب با هر مرحله از روند تغییر می دهد.

مواد استاندارد موجود در مخلوط عبارتند از:

 الگوی دی ان ای

 پرایمرهای خاص

 آنزیم DNA پلیمراز مقاوم در برابر حرارت

چهار نوع مختلف نوکلئوتیدهای 

 نمک های مورد نیاز (بافر) برای ایجاد یک محیط مناسب برای عملکرد آنزیم

روند PCR چگونه است؟

روش PCR شامل فرایندی از گرمایش و سرمایش با عنوان چرخه حرارتی است که توسط دستگاه انجام می شود و در واقع یک فرآیند سه مرحله ای است که در چرخه های مکرر اجرا می گردد.

در روند روش PCR سه مرحله اصلی وجود دارد که عبارتند از :

مرحله Denaturingهنگامی که دو رشته DNA الگو گرم می شود تا پیوندهای هیدروژن بین رشته های مارپیچ DNA را شکسته و دو رشته منفرد ایجاد کند. این کار در دمای حدود 95 درجه سانتیگراد (203 درجه فارنهایت) انجام می شود.

مرحله Annealing هنگامی که دما کم می شود تا پرایمرهای دی ان ای بتوانند به هردو رشته DNA الگوی متصل شوند و پلیمریزاسیون آغاز شود. در این مرحله دما تا حدود 55 درجه سانتیگراد (131 درجه فارنهایت) کاهش می یابد.

مرحله Extendingهنگامی که دما افزایش می یابد و رشته جدید DNA توسط آنزیم پلیمراز Taq ساخته میشود،آنزیمی که در اصل از یک باکتری ترموفیلیک به نام Thermus aquaticus جدا شده است ،ترتیب اضافه شدن نوکلئوتیدهای  آزاد توسط توالی نوکلئوتیدها در رشته اصلی دی ان ای (الگو) مشخص می شود. درجه حرارت در این مرحله تا حدود 72 درجه سانتیگراد (162 درجه فارنهایت) افزایش می یابد و در پایان چرخه که حدوداً پنج دقیقه به طول می انجامد،درجه حرارت بالا می رود و روند کار دوباره آغاز می شود.

تعداد نسخه ها بعد از هر چرخه دو برابر می شود و معمولاً 25 تا 30 سیکل مقدار کافی DNA را تولید می کند.و واکنش PCR كامل در چند ساعت و يا حتي كمتر از يك ساعت با دستگاه هاي پر سرعت انجام مي شود،پس از اتمام PCR، روشی به نام الکتروفورز می تواند برای بررسی کمیت و اندازه قطعات دی ان ای تولید شده، استفاده شود، روش های جدید PCR شامل  real-time PCR یا  qPCRو dPCR می باشد،در qPCR، تکثیر DNA در زمان واقعی کنترل می شود و اجازه می دهد کمی از DNA هدف در طی فرایند استفاده شود.

روش dPCR یک رویکرد جدید و تصفیه شده تر است که روند PCR را در مراحل بسیار کوچک تر شکسته است این افزایش دقت، اندازه گیری های قابل اطمینان تر و اندازه گیری مطلق از نمونه های بسیار کوچک یا مخلوط را ارائه می دهد و فناوری PCR هنوز در حال توسعه است ادامه روند توسعه و بهسازی فرایندها و ابزارهای مورد استفاده اجازه می دهد تا این فرآیند برای رفع نیازهای تخصصی تطبیق یابد.

فروش کیت pcr

شرکت بازرگانی ندا شیمی وارد کننده کیت های PCR از برندهای Thermofisher- Qiagen-Invitrogen Fermantase  و   سایر برندهای معتبر و مطرح دنیا می باشد.  

خرید کیت تحقیقاتی pcr

برای سفارش درخواست های خود می توانید با شماره های ذیل تماس بگیرید.

خرید کیت تحقیقاتی

دفترمرکزی فروش تهران : 44045418 021 (زمان اداری)

واتساپ و تلگرام : 09394453175 (برای استعلام فوری و ان لاین در زمان اداری و غیر اداری)

مدیریت : 09914214699

منابع :

https://www.sigmaaldrich.com

https://www.qiagen.com

https://worldwide.promega.com

https://www.civilica.com

 

 

 

2 پاسخ

دیدگاه ها غیر فعال است.