نوشته‌ها

کیت تحقیقاتیpcr

کیت pcr

راهنمای کامل خرید کیت PCR :

واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR)، روشی است که برای ساخت نسخه های بی شماری از یک قطعه خاص از DNA به سرعت و با دقت انجام می شود،واکنش زنجیره ای پلیمراز محققان را قادر می سازد مقادیر زیادی دی ان ای را که برای آزمایش ها و مراحل مختلف در زیست شناسی مولکولی، تجزیه و تحلیل پزشکی قانونی، زیست شناسی تکاملی و تشخیص پزشکی لازم است بدست آورند.

تاریخچه ساخت کیت PCR :

کیت تحقیقاتی PCR در سال 1983 توسط بیوشیمیست آمریکایی و کری مالیس ساخته شد،وی در سال 1993 به دلیل کارهای پیشگامانه جایزه نوبل شیمی را به دست آورد و قبل از توسعه  روش PCR ، روش های بکار رفته در تولید نسخه هایی از قطعات دی ان ای نوترکیب وقت گیر و پر کار بودند اما امروزه ماشینی که برای انجام واکنش های پی سی ار طراحی شده است، می تواند تنها در طی چند ساعت میلیاردها نسخه DNA را از یک قطعه دی ان ای تولید کند.

مرحله PCR روشی رایج است که در آزمایشگاه های تحقیقات پزشکی و بیولوژیکی مورد استفاده قرار می گیرد در مراحل اولیه پردازش DNA برای تعیین توالی استفاده می شود همچنین برای شناسایی وجود یا عدم وجود یک ژن، برای شناسایی عوامل بیماری زا در هنگام عفونت و تولید نمودار های DNA پزشکی قانونی از نمونه های ریز دی ان ای کمک می گیرند.

pcr-kit

pcr-kit

معرفی دستگاه PCR و ترموسایکلر به عنوان اساس کار این دستگاه:

روش PCR اتفاقی است که در سلول می افتد را در شرایط کنترل شده در آزمایشگاه شبیه سازی می کند. یعنی وقتی DNA قبل از تقسیم سلولی کپی (تکثیر) می شود ، ماشینی که استفاده می شود به سادگی یک دستگاه PCR یا یک ترموسیکلر نامیده می شود ،لوله های آزمایشگاهی حاوی مخلوط مورد علاقه دی ان ای در دستگاه قرار داده می شوند و دستگاه دما را متناسب با هر مرحله از روند تغییر می دهد.

مواد استاندارد موجود در مخلوط عبارتند از:

 الگوی دی ان ای

 پرایمرهای خاص

 آنزیم DNA پلیمراز مقاوم در برابر حرارت

چهار نوع مختلف نوکلئوتیدهای 

 نمک های مورد نیاز (بافر) برای ایجاد یک محیط مناسب برای عملکرد آنزیم

روند PCR چگونه است؟

روش PCR شامل فرایندی از گرمایش و سرمایش با عنوان چرخه حرارتی است که توسط دستگاه انجام می شود و در واقع یک فرآیند سه مرحله ای است که در چرخه های مکرر اجرا می گردد.

در روند روش PCR سه مرحله اصلی وجود دارد که عبارتند از :

مرحله Denaturingهنگامی که دو رشته DNA الگو گرم می شود تا پیوندهای هیدروژن بین رشته های مارپیچ DNA را شکسته و دو رشته منفرد ایجاد کند. این کار در دمای حدود 95 درجه سانتیگراد (203 درجه فارنهایت) انجام می شود.

مرحله Annealing هنگامی که دما کم می شود تا پرایمرهای دی ان ای بتوانند به هردو رشته DNA الگوی متصل شوند و پلیمریزاسیون آغاز شود. در این مرحله دما تا حدود 55 درجه سانتیگراد (131 درجه فارنهایت) کاهش می یابد.

مرحله Extendingهنگامی که دما افزایش می یابد و رشته جدید DNA توسط آنزیم پلیمراز Taq ساخته میشود،آنزیمی که در اصل از یک باکتری ترموفیلیک به نام Thermus aquaticus جدا شده است ،ترتیب اضافه شدن نوکلئوتیدهای  آزاد توسط توالی نوکلئوتیدها در رشته اصلی دی ان ای (الگو) مشخص می شود. درجه حرارت در این مرحله تا حدود 72 درجه سانتیگراد (162 درجه فارنهایت) افزایش می یابد و در پایان چرخه که حدوداً پنج دقیقه به طول می انجامد،درجه حرارت بالا می رود و روند کار دوباره آغاز می شود.

تعداد نسخه ها بعد از هر چرخه دو برابر می شود و معمولاً 25 تا 30 سیکل مقدار کافی DNA را تولید می کند.و واکنش PCR كامل در چند ساعت و يا حتي كمتر از يك ساعت با دستگاه هاي پر سرعت انجام مي شود،پس از اتمام PCR، روشی به نام الکتروفورز می تواند برای بررسی کمیت و اندازه قطعات دی ان ای تولید شده، استفاده شود، روش های جدید PCR شامل  real-time PCR یا  qPCRو dPCR می باشد،در qPCR، تکثیر DNA در زمان واقعی کنترل می شود و اجازه می دهد کمی از DNA هدف در طی فرایند استفاده شود.

روش dPCR یک رویکرد جدید و تصفیه شده تر است که روند PCR را در مراحل بسیار کوچک تر شکسته است این افزایش دقت، اندازه گیری های قابل اطمینان تر و اندازه گیری مطلق از نمونه های بسیار کوچک یا مخلوط را ارائه می دهد و فناوری PCR هنوز در حال توسعه است ادامه روند توسعه و بهسازی فرایندها و ابزارهای مورد استفاده اجازه می دهد تا این فرآیند برای رفع نیازهای تخصصی تطبیق یابد.

فروش کیت pcr

شرکت بازرگانی ندا شیمی وارد کننده کیت های PCR از برندهای Thermofisher- Qiagen-Invitrogen Fermantase  و   سایر برندهای معتبر و مطرح دنیا می باشد.  

خرید کیت تحقیقاتی pcr

برای سفارش درخواست های خود می توانید با شماره های ذیل تماس بگیرید.

خرید کیت تحقیقاتی

دفترمرکزی فروش تهران : 44045418 021 (زمان اداری)

واتساپ و تلگرام : 09394453175 (برای استعلام فوری و ان لاین در زمان اداری و غیر اداری)

مدیریت : 09914214699

منابع :

https://www.sigmaaldrich.com

https://www.qiagen.com

https://worldwide.promega.com

https://www.civilica.com

 

 

 

کیت الایزا

تکنیک  ELISA

الایزا (ELISA) یک روش بیوشیمیایی تحلیلی است که برای اولین بار توسط Engvall و Perlmann در سال 1972 شرح داده شد.

ELISA به عنوان یک ابزار تشخیصی در پزشکی، آسیب شناسی گیاهان، بیوتکنولوژی و همچنین به عنوان کنترل کیفیت در صنایع مختلف مورد استفاده قرار گرفته است.

ELISA روشی است که در آن می توان آنتی بادی ها، پپتیدها، پروتئین ها و مولکول های کوچک را با استفاده از یک صفحه چند چاهکی شناسایی و اندازه گیری کرد و در واقع روشی برتر برای تعیین تیتر آنتی بادی ها می باشد.

ELISA همچنین می تواند برای ارزیابی کمی یک آنتی ژن در یک نمونه، که اغلب در قالب کیت های (kit) راحت و با کاربرد آسان در دسترس هستند، با موفقیت به کار رود.

چهار نوع روش ELISA وجود دارد:

آزمایش ELISA بر اساس چگونگی پیوند و استفاده از آنالیت ها و آنتی بادی ها به چندین نوع روش تقسیم می شود.

  1.  الایزا مستقیم (Direct ELISA) :

سریع ترین روش است و مراحل کمتری دارد (6 مرحله) همچنین مستعد خطای کمتری می باشد.

الایزای مستقیم دارای دو روش الايزاي مستقيم براساس جذب يا پوشش‌دهي آنتي‌ژن و الايزاي مستقيم براساس جذب يا پوشش‌دهي آنتي‌بادي می باشد.

در این روش آنتی ژن هدف یا آنتی بادی هدف در نمونه ای که باید تشخیص داده شود به طور مستقیم بر سطح فاز جامد (چاهک های میکروپلاته) کوت می شود ،شستشو انجام می گیرد و یک آنتی بادی متصل به آنزیم یا یک آنتی ژن اختصاصی آنتی بادی هدف اضافه شده و انکوبه می گردد،پس از شستشو، سیگنالی متناسب با مقدار آنتی ژن موجود در نمونه تولید می شود و فعالیت آنزیم ریزپلاته خوب با الایزاریدر اندازه گیری می شود.

  1. الایزا غیرمستقیم (Indirect ELISA):

الایزا غیرمستقیم براي مشخص نمودن آنتي‌بادي اختصاصی عليه يك پاتوژن خاص يا تیتراسیون آنتی بادی در نمونه های سرم مورد استفاده قرار می گیرد و 8 مرحله دارد ،در این روش آنتی ژن بر روی سطح چاهک های میکروپلاته کوت می شود (آنتی ژن کوت شده آنتی ژن اختصاصی مربوط به آنتی بادی است که قرار است در نمونه رديابی شود).

شستشو انجام می گیرد و آنتی بادی اولیه (عليه آنتي‌ژن پوشش داده شده) اضافه شده و انکوبه می شود. به دنبال آن یک آنتی بادی ثانویه در برابر آنتی بادی اولیه قرار می گیرد و باز هم انکوباسیون می شود.

این آنتی بادی ثانویه اغلب یک آنتی بادی ضد پلی کلونال است. پس از شستشو، بواسطه فعالیت آنزیم ریزپلاته خوب با الایزاریدر اندازه گیری می شود.

  1. الایزا ساندویچ (Immunometric / Sandwich ELISA):

در الایزا ساندویچ از دو آنتی بادی اختصاصی آنتی ژن برای گرفتن یا “ساندویچ” آنتی ژن در چاهک برای تشخیص استفاده کنید. سنجش های ایمونومتریک ارتباط مستقیمی بین غلظت آنتی ژن و پاسخ سوبسترا دارند ،در این روش یک آنتی بادی در سطح چاهک های میکروپلاته کوت می شود و ابتدا آنتی ژن و سپس آنتی بادی اختصاصی آنتی بادی هدف که با آنزیم کونژوگه شده، اضافه می گردد ،انکوباسیون انجام می شود و پس از شستشو، هنگامی که بستر کروموژنیک برای توسعه رنگ به سنجش اضافه می شود، نمونه هایی با غلظت آنتی ژن بالا سیگنال بیشتری را نسبت به آن هایی که غلظت آنتی ژن پایین دارند، تولید می کنند.

آنتی بادی بی حرکت (نارنجی) و آنتی بادی دارای آنزیم (سبز) باید اپی توپ های مختلف آنتی ژن هدف را تشخیص دهند. در نهایت فعالیت آنزیم ریزپلاته خوب با الایزاریدر اندازه گیری می شود.

  1. الایزا رقابتی (Competitive ELISA):

ELISA رقابتی نسبتاً پیچیده است زیرا شامل استفاده از آنتی ژن مهار کننده است. در الایزا رقابتی اساس سنجش، رقابت بین دو آنتی ژن يا دو آنتی بادی (که يکی از آن دو نشاندار است) برای اتصال به لیگاند با مقدار محدود می باشد ،در این روش در مرحله اول، آنتی بادی اولیه بدون آنزیم با نمونه حاوی آنتی ژن انکوبه می شود و منجر به تشکیل کمپلکس آنتی ژن آنتی بادی (Ag-Ab) می گردد ،در این مرحله، مقدار آنتی بادی در مقایسه با آنتی ژن بیش از حد است ،در مرحله دوم، کمپلکس Ag-Ab به سطح چاهک های میکروپلاته پوشیده شده با آنتی ژن مهار کننده، اضافه می شود که می تواند به آنتی بادی اولیه وصل شود ،سپس آنتی بادی های غیر متصل شده بوسیله شستشو حذف می شوند.

در مرحله سوم، آنتی بادی ثانویه دارای آنزیم که برای آنتی بادی اولیه اختصاصی است، اضافه می شود و به آنتی بادی اولیه متصل به آنتی ژن مهار کننده متصل می گردد ،سرانجام یک سوبسترا اضافه می شود تا با آنزیم واکنش نشان دهد و یک سیگنال قابل مشاهده برای تشخیص منتشر کند و با الایزاریدر اندازه گیری شود.

خرید کیت الایزا

elisa-kit

elisa-kit

شرکت بازرگانی ندا شیمی وارد کننده کیت های ELISA از برندهای معتبر و مطرح دنیا می باشد. این شرکت در مورد کلیه فروش و خدمات خود ضمانت اصل بودن کالا را متعهد می باشد و در کمترین زمان ممکن اقدام به تحویل مرسوله خواهد نمود.

فروش کیت الایزا

برای سفارش درخواست های خود می توانید با شماره های ذیل تماس بگیرید.

دفترمرکزی فروش تهران : 44045418  021 (زمان اداری)

واتساپ و تلگرام : 09394453175  (برای استعلام فوری و ان لاین در زمان اداری و غیر اداری)

مدیریت : 09914214699

RNA

کیت استخراج RNA

کیت استخراج RNA

کیت استخراج RNA بر اساس اینکه از چه نمونه ای می توان استخراج را انجام داد مثل سلول،افت،مخمر، گیاهان و… و همچنین روش های استخراج و تعداد استخراج دارای کد های مختلف در برند های مختلف هستند.

برای استفاده از کیت خریداری شده باید مراحل اصلی پروتکل کیت مربوطه مطالعه شود . متداول ترین روش استخراج  RNA استخراج بوسیله تیرازول و RNeasy می باشد.

لیز سلول را می توان با استفاده از بافرها یا معرف های مانند ایزوتیوسیانات گوانیدینیوم ، کلرید گوانیدینیوم ، سدیم ددسیل سولفات سدیم (SDS) ، فنل یا کلروفرم و… بدست آورد. TRIzol یا RNAlater می تواند برای حفظ یکپارچگی  RNA  در حین لیز استفاده شود.

دناتوراسیون DNA  بوسیله DNase  مورد استفاده قرار  می گیرد ، در حالی که می توان پروتئیناز K را به هضم پروتئین ها اضافه کرد. از طرف دیگر ، استخراج ارگانیک مکرر با استفاده از فنل و کلروفرم یا حل کردن نمونه در بافرهای حاوی نمک گوانیدینیوم نیز می تواند برای از بین بردن پروتئین ها استفاده شود.

شرکت بازرگانی ندا شیرین ایرانیان با نام تجاری ندا شیمی وارد کننده کیت های آزمایشگاهی و تحقیقاتی  و الایزا و تیرازول  از برندهای مطرح دنیا است.

برای سفارش اینترنتی درخواست های خود می توانید با شماره های فوق تماس بگیرید.

دفتر مرکزی فروش تهران : 02144045418 (4 خط ) زمان اداری

واتساپ و تلگرام : 09394453175 زمان اداری و پایان زمان اداری

مدیریت : 09914214699  دکتر ندا شیرین

کیت PCR

کیتpcr

کیت تخلیص محصول PCR

خرید کیت pcr

در راستای تحقیق و توسعه پروژهای دانشجویی و مراکز تحقیقاتی و تشخیصی کیت های PCR   مورد استفاده قرار می گیرند.

کاربرد تکنیک PCR – Polymerase Chain Reaction

 واکنش زنجیره ای پلیمرازPCR یکی از قدرتمندترین  روش های مولکولی می باشد که در سال های اخیر شکل گرفته و توسعه یافته است.

اساس PCR  بر مبنای تکثیر ناحیه مشخصی از DNA  یا RNA  می باشد .در این روش در عرض چند ساعت میلیون ها و میلیاردها قطعه از ناحیه مورد نظر تکثیر می شود و این مقدار از قطعه بدست آمده را می توان برای انجام آنالیزهای مختلف یا آزمایش های دیگر به کار برد.

شرکت بازرگانی ندا شیرین ایرانیان با نام تجاری ندا شیمی وارد کننده کیت های PCR  از برندهای مطرح دنیا است.

برای سفارش اینترنتی و قیمت کیت pcr خود می توانید با شماره های فوق تماس بگیرید.

دفتر مرکزی فروش تهران : 021-44045418 (4 خط ) زمان اداری

واتساپ و تلگرام : 09394453175 زمان اداری و پایان زمان اداری

مدیریت : 09914214699  (دکتر ندا شیرین)

 

نمایندگی اصلی کیت ترموفیشر در ایران

شرکت ترموفیشر

کیت تحقیقاتی ترموفیشر

شرکت Thermo Fisher Scientific  یک شرکت بیوتکنولوژی امریکایی است که در ماساچوست امریکا قرار دارد در سال 2006توسط ادغام Thermo fisher  و   Thermo Electron تاسیس شده است.

برند های  Thermo Scientific – Applied Biosystems Invitrogen – Fisher Scientific- Unity Lab Services زیر مجموعه این شرکت است.

تولیدهایThermo Fisher Scientificشامل کیت های آزمایشگاهی و تحقیقاتی ازجمله کیت های استخراج DNA – RNA  و کیت های PCR ، کیت های الایزا ، پروتین ها و آنتی بادی های بیولوژی،محیط کشت های سلولی،بافرها و محلول های استاندارد شیمیایی و… می باشد.

خرید کیت ترموفیشر

شرکت ندا شیمی تنهاترین و اصلی ترین نماینده برندهای Therm fisher Scientific – کیت ترموفیشر ساینتیفیک- Applied Biosystems – اپلیید بیوسیستمز- Invitrogen -اینویتروژن و Fisher Scientific  و Thermo Scientificو Unity Lab Services می باشد و واردات خود را در کمترین زمان ممکن انجام می دهد و  همچنین اصل بودن کالای ارائه شده را تضمین می کند.

Thermo_Fisher_nedashimi

Thermo_Fisher

نمایندگی ترموفیشر در ایران

برای سفارش اینترنتی انواع کیت می توانید با شماره های فوق تماس بگیرید.

دفتر مرکزی فروش تهران : 44045418 021  (زمان اداری)

واتساپ و تلگرام : 09394453175 (زمان اداری و پایان زمان اداری)

مدیریت  شرکت ندا شیمی : 09914214699

 

نمونه کارها